Transferir colônias de uma placa de Petri para outra é uma técnica fundamental em microbiologia e cultura de células. Como fornecedor de placas de Petri, testemunhei em primeira mão a importância desse processo em várias pesquisas e ambientes experimentais. Neste blog, vou orientá-lo no procedimento passo a passo da transferência de colônias, discutirei os materiais necessários e destacará algumas dicas e precauções para garantir uma transferência bem-sucedida.
Compreendendo o objetivo da transferência de colônias
Antes de se aprofundar no processo de transferência, é essencial entender por que transferimos colônias de uma placa de Petri para outra. Existem várias razões para isso:
- Isolamento e purificação: A transferência de colônias nos permite isolar um único tipo de microorganismo ou linha celular de uma cultura mista. Isso é crucial para obter uma cultura pura, necessária para análises e experimentações adicionais.
- Subcultura: Com o tempo, os nutrientes em uma placa de Petri podem ficar esgotados e as condições de crescimento podem mudar. A transferência de colônias para uma nova placa de Petri fornece um novo suprimento de nutrientes e um ambiente mais favorável para o crescimento.
- Armazenamento de longo prazo: As colônias podem ser transferidas para um meio adequado e armazenadas em condições específicas para preservação a longo prazo. Isso é útil para manter uma cultura de estoque para uso futuro.
Materiais necessários
Para transferir colônias de uma placa de Petri para outra, você precisará dos seguintes materiais:
- Patri pratos: Você precisará de duas placas de Petri - uma contendo as colônias originais (prato de origem) e outra com um meio de crescimento adequado (prato de destino). NossoVidro de laboratório 90mm 100 mm 120mm Petri Patri com tampaseLaboratório de vidro de laboratório Petri 60mm Mm 90mm 100mm Culture Culture With Lidssão excelentes opções para esse fim. Eles são feitos de vidro de alta qualidade, que fornece uma visão clara das colônias e é resistente ao estresse químico e térmico.
- Inocular loop ou agulha: Um laço ou agulha de inoculação é usado para capturar as colônias do prato de origem e transferi -las para o prato de destino. Essas ferramentas geralmente são feitas de metal e podem ser esterilizadas por flamejamento antes e depois do uso.
- Burnen queimador ou esterilizador: Um queimador ou esterilizador de Bunsen é usado para esterilizar o loop ou a agulha de inoculação. Isso ajuda a impedir a contaminação das colônias durante o processo de transferência.
- Incubadora: Uma incubadora é usada para fornecer um ambiente controlado para o crescimento das colônias. A temperatura, a umidade e a composição do gás da incubadora podem ser ajustadas para atender aos requisitos específicos dos microorganismos ou linhas celulares que estão sendo cultivadas.
- Bancada estéril ou capô: Uma bancada estéril ou capô é usada para minimizar o risco de contaminação durante o processo de transferência. Esses espaços de trabalho estão equipados com um filtro HEPA que remove partículas e microorganismos transportados pelo ar, criando um ambiente limpo e estéril.
Procedimento passo a passo
Agora que você tem todos os materiais necessários, vamos percorrer o procedimento passo a passo da transferência de colônias de uma placa de Petri para outra:
- Prepare o espaço de trabalho: Antes de iniciar o processo de transferência, verifique se o seu espaço de trabalho está limpo e estéril. Limpe a bancada ou o capô com uma solução desinfetante e ligue o queimador de Bunsen ou esterilizador para aquecer o loop ou a agulha de inoculação.
- Rotule o prato de destino: Use um marcador para rotular o prato de destino com o nome do microorganismo ou da linha celular, a data e qualquer outra informação relevante. Isso ajudará você a acompanhar suas culturas e garantir que você não as misture.
- Chama o loop ou agulha de inoculação: Segure o laço ou a agulha de inoculação pela alça e passe-a através da chama do queimador ou do esterilizador de Bunsen até brilhar em brasa. Isso esterilizará o loop ou a agulha e matará qualquer microorganismos ou contaminantes em sua superfície.
- Deixe o loop ou a agulha esfriar: Depois de flamear o loop ou agulha de inoculação, deixe esfriar por alguns segundos antes de usá -lo para capturar as colônias. Isso impedirá que o loop quente ou a agulha matem as colônias quando você as tocar.
- Pegue as colônias: Abra o prato de origem e use o loop ou a agulha de inoculação para pegar uma única colônia na superfície do ágar. Cuidado para não tocar em outras colônias ou o próprio ágar, pois isso pode introduzir contaminação.
- Transfira as colônias para o prato de destino: Abra o prato de destino e ligue suavemente o loop de inoculação ou a agulha que contém a colônia na superfície do ágar em um padrão em zigue -zague. Isso distribuirá as colônias uniformemente através do ágar e permitirá que elas cresçam em colônias individuais.
- Chama o loop ou agulha de inoculação novamente: Depois de transferir as colônias, chama o loop ou a agulha de inoculação novamente para esterilizá -lo e impedir a contaminação da próxima cultura.
- Feche as placas de Petri: Feche bem a fonte e o destino dos pratos para evitar a contaminação e coloque -os na incubadora na temperatura e umidade apropriadas.
- Monitorar o crescimento das colônias: Verifique as placas de Petri regularmente para monitorar o crescimento das colônias. Depois de alguns dias, você verá colônias individuais crescendo na superfície do ágar. Se necessário, você pode transferir as colônias para uma nova placa de Petri para continuar a cultura.
Dicas e precauções
A transferência de colônias de uma placa de Petri para outra requer atenção cuidadosa aos detalhes e aderência estrita às técnicas assépticas. Aqui estão algumas dicas e precauções para ajudá -lo a garantir uma transferência bem -sucedida:
- Trabalhar em um ambiente estéril: Sempre trabalhe em uma bancada estéril ou capuz para minimizar o risco de contaminação. Use luvas e um casaco de laboratório e evite tocar as placas de Petri ou o laço ou a agulha inoculada com as mãos nuas.
- Esterilize o equipamento: Antes e depois de cada uso, esterilize o loop ou a agulha de inoculação, flameando-o até brilhar em brasa. Isso matará quaisquer microorganismos ou contaminantes em sua superfície e impedirá a contaminação das culturas.
- Use uma única colônia: Ao pegar as colônias, sempre use uma única colônia da superfície do ágar. Isso garantirá que você esteja transferindo uma cultura pura e impedirá a contaminação de outros microorganismos ou linhas celulares.
- Retire o ágar corretamente: Ao jogar o ágar, use um movimento suave em zigue -zague para distribuir as colônias uniformemente pela superfície. Evite pressionar demais o ágar, pois isso pode danificar as colônias e impedir que elas cresçam.
- Monitorar o crescimento das colônias: Verifique as placas de Petri regularmente para monitorar o crescimento das colônias. Se você notar algum sinal de contaminação, como mofo ou bactérias que crescem no ágar, descarte a cultura imediatamente e comece de novo.
Conclusão
Transferir colônias de uma placa de Petri para outra é uma técnica simples, mas essencial, em microbiologia e cultura de células. Seguindo o procedimento passo a passo descrito neste blog e tomando as precauções necessárias, você pode garantir uma transferência bem-sucedida e obter uma cultura pura do microorganismo ou linha celular com a qual está trabalhando.
Como fornecedor de placas de Petri, entendemos a importância de fornecer produtos de alta qualidade que atendam às necessidades de nossos clientes. NossoVidro de laboratório 90mm 100 mm 120mm Petri Patri com tampaseLaboratório de vidro de laboratório Petri 60mm Mm 90mm 100mm Culture Culture With Lidssão projetados para fornecer uma visão clara das colônias e são resistentes ao estresse químico e térmico. Se você tiver alguma dúvida ou precisar de mais informações sobre nossos produtos, não hesite em entrar em contato conosco. Ficaríamos felizes em ajudá -lo com suas necessidades de compras.
Referências
- Atlas, RM (2010). Manual de meios microbiológicos. CRC Press.
- Cappuccino, JG, & Sherman, N. (2014). Microbiologia: um manual de laboratório. Pearson.
- Madigan, MT, Martinko, JM, Bender, KS, Buckley, DH, & Stahl, DA (2015). Biologia de Microorganismos de Brock. Pearson.